RT-PCR и QPCR

Обратная цепная реакция транскрипционной полимеразы (RT-PCR)

RT-PCR против QPCR

Прогресс в области биотехнологии привел к открытию нескольких способов справиться с требованиями пересадки органов на протяжении многих лет. Раньше индивидуум, который добровольно пожертвовал бы какой-либо орган сразу после смерти больному, нуждающемуся в помощи, мог только начать операцию по пересадке. Биологические исследования и исследования привели к открытию стволовых клеток.

Стволовые клетки относятся к тем, которые взяты из ДНК эмбриона, которые будут служить источником для регенерации клеток, которые в основном были бы клоном органа, где была извлечена ДНК. В то время как правозащитники лоббируют прекращение таких процедур, успешные операции действительно доказали эффективность развития стволовых клеток при трансплантации органов.

Однако, прежде чем можно понять и полностью понять стволовые клетки, необходимо ознакомиться с различными терминами, связанными с этим научным открытием. Выращивание стволовых клеток связано с ДНК и ее кодированием. Таким образом, для студентов или любых лиц, заинтересованных в поле, важно различать RT-PCR и qPCR.

Целевая реакция обратной транскрипционной полимеразы (RT-PCR) является одним из многих вариантов полимеразной цепной реакции или ПЦР. Этот лабораторный метод широко используется в молекулярной биологии, чтобы ученые могли создавать множественные копии определенной последовательности ДНК посредством процесса, выдутого как «амплификация». Разница между RT-PCR и традиционной ПЦР заключается в том, что РНК сначала транскрибируется в обратном порядке его ДНК-комплемент, который использует обратную транскриптазу. Новая комплементарная ДНК, содержащая обратную транскрипцию, будет затем амплифицироваться с использованием традиционной ПЦР или ПЦР в реальном времени.

Большинство студентов, изучающих этот процесс, часто совершают ошибку, заменяя ПЦР обратной транскрипции и ПЦР в реальном времени, так как они оба сокращены аналогично. Чтобы избежать путаницы, биологи отмечают ПЦР в реальном времени как количественную ПЦР в реальном времени или qPCR.

QPCR сильно отличается от RT-PCR, поскольку qPCR отвечает за измерение усиления по мере его возникновения. Можно сказать, что RT-PCR запускает процесс амплификации, а qPCR измеряет его по мере прохождения процедуры.

Количественная ПЦР в реальном времени

QPCR фактически произвела революцию в традиционном методе одностороннего подхода, когда дело доходит до количественной оценки ДНК и РНК, поскольку применение метода qPCR позволяет биологам определять начальную концентрацию ядерной кислоты даже до того, как были обнаружены результаты реакции и записано.

Применение qPCR, которое сейчас считается самым мощным и чувствительным методом анализа генетических исследований, значительно расширилось. В настоящее время он участвует в количественном анализе экспрессии генов, генотипировании, выявлении патогенов и анализе SNP наряду с измерениями интерференции РНК.

QPCR часто сочетается с процессом обратной транскрипции для количественной оценки мессенджеров РНК и микроРНК, присутствующих в клетках тканей, которые наблюдаются и экспериментируются. Это дает еще одну видимую разницу между двумя: RT-PCR может использоваться для процесса амплификации, но для целей количественной оценки его необходимо сплавить с qPCR.

Также известно, что QPCR является более количественным, поскольку данные могут быть собраны по мере роста экспоненциального роста (log) фазы ПЦР. Биологи отмечают, что количество побочного продукта ПЦР прямо пропорционально количеству матричной нуклеиновой кислоты, которое будет измеряться через qPCR.

С другой стороны, RT-PCR далека от количественного характера, поскольку соблюдение интенсивности амплифицированной полосы на геле после заданного стандарта концентрации может привести к полу-количественному выводу.

Резюме:

1.QPCR и RT-PCR - оба термина, используемые в биотехнологии и используемые для производства нескольких копий ДНК. 2.RT-PCR используется для усиления обратной транскрипции ДНК-кода; QPCR измеряет усиление. 3.RT-PCR предназначена для амплификации, а qPCR - для количественной оценки. 4.QPCR носит количественный характер, а RT-PCR - нет.